
2、 脐带血制备:无菌操作,高效提取干细胞
首先,信息核实。
取血员将脐带血袋和母亲的外周血先送入收血室,为了确保每份脐带血在脐带血库中的身份及其识别信息的正确性和有效性,工作人员会检查核实存储资料,只有相关资料完全才能够留档。同时还会检查血袋是否完整,脐带血重量是否达标(入库标准是脐带血要达到50毫升)等。如果所采集的脐带血的数量不够标准,在后期的临床使用上就会有困难。只有脐带血各项信息核实达到入库标准后,才会对血袋进行唯一编码,每一份脐带血都是唯一的。

其次,细胞计数。
造血干细胞在有核细胞里面,因此,有核细胞的数量决定着造血干细胞的数量,在计数室里有五分类细胞计数仪,对脐带血中的有核细胞进行分类计数,脐带血有核细胞数量合格的才能进入制备室。
最后,制备分离。
在脐带血制备过程中,对环境的要求相当之高,配有完全独立的风机空调系统,用以维持内部洁净环境。其洁净度设计及管理均严格按照国家GMP标准。制备室是万级无菌实验室,操作台是百级无菌操作台,相当于医院手术台的洁净程度。同时,为了保证每份脐带血的高质量制备,北京市脐带血库采用国际最先进的仪器、试剂和耗材。
脐带血的制备是将其成分分离、提纯、留取血样的过程,这个过程对于脐带血是否能够成功冻存起到关键作用。北京市脐带血库引进AXP全自动脐带血制备系统,脐带血的制备水平已经提升到了国际领先标准。整个制备流程是在全封闭的系统中进行,在确保脐带血制备过程的安全的前题下,提高有核细胞的回收率和分离效果的稳定性。脐带血中的红细胞和血浆等都会在离心过程中自动去除,最终留存富含造血干细胞的有核细胞成分。
在制备后,要再次进行细胞计数,以评估制备效果和终产品质量,如果不达标,还是不能最终入库。可见,脐带血储存每个环节都需严格把关。
3、 脐带血检测:保证安全与有效
在脐带血的制备过程中,工作人员会留取一部分血样,连同母亲的血液样本进行一系列安全性、有效性检测,包括病毒核酸检测、微生物酶免检测、无菌检测、造血干细胞数量及活力检测等。

其中,造血干细胞的活力检测,是模拟人体的环境对干细胞进行长达14天的增殖培养,检测其增殖活性与分化能力。
脐带血只有经过以上三大步骤,满足各个环节的特定标准,才可以进行冷冻储存。也就是说,一份小小的脐带血之所以能够挽救生命,不仅仅在于它的干细胞的特殊功能,也要归功于脐带血储存各个环节慎密严谨的工作步骤,如果失去其中的任一个环节,脐带血都不能进行储存,更不能发挥它的医学价值,也不能挽救生命。
4、 脐带血冻存:深低温冷冻确保细胞活性
冷冻环节是最后的环节,但也同样是至关重要的。脐带血放入液氮正式储存前,为了防止造血干细胞在低温环境中破损,需要对脐带血加入冷冻保护剂,进行降温处理。在降温的过程中,要利用专业的计算机程序逐步缓慢降低温度,直至-90°C后才可以转入-196℃深低温液氮中进行长期冻存,这样才可以保证和不影响干细胞的活性。脐带血对于储存温度和储存环境的要求非常高,只有深低温冻存状态下才能使细胞处于休眠状态,细胞中所有酶被抑制,不会发生电离损伤,才可长期冻存。至此,一份可用于临床使用的脐带血才正式诞生。

北京市脐带血库首次引进世界上单体存储量最大的MVE液氮罐,所有液氮罐由真空管道相连,终端连接于户外的2万立升储量的液氮存储塔,对已经储存的脐带血进行24小时不间断补充液氮。同时,有闭路监控、红外线报警、液位监视、双电路供电、氧含量实时监控等24小时不间断监控系统严格监控,保证脐带血存储环境的安全性。
对于脐带血的储存时间,从理论上来讲,造血干细胞可以进行长期冻存,对时间是没有限制的。长期冷冻储存也不会影响干细胞的活性与临床使用。国外有一份冻存了23.5年的脐带血拿出来解冻复苏,实验证明其活性没有问题。北京市脐带血库1996年成立至今,曾提供保存了14年的脐带血给临床使用,其解冻后的活性仍然有96.14%。
脐带血从婴儿出生就开始储存,一直伴随着孩子成长,在孩子未成年(18岁)之前,父母代其决定储存,在18岁后,需要自己选择继续冻存还是放弃。有些家长认为,在孩子成年之后,脐带血派不上用场,失去了所谓的医疗价值,选择放弃继续存储脐带血。其实不然,脐带血不论是对于孩子还是家长或者亲属,从自体移植和同基因移植的角度来看,一旦需要被采用,脐带血都可对于孩子自身和家人的生命提供保障。